与小鼠、大鼠相比,兔的体型更适合反复采血和影像学观察,因此在骨关节炎、动脉粥样硬化、急性呼吸窘迫综合征等模型中具有不可替代的地位。兔血清IL-6基线浓度较低,健康兔通常在5 pg/mL以下,模型诱导后可上升数十倍。
在兔骨关节炎模型中,关节腔内注射碘乙酸盐(MIA)后,血清IL-6在第3天达到峰值,滑膜组织匀浆中IL-6升高可持续至第14天。此时采血应固定在上午同一时段,因为皮质醇昼夜节律会影响细胞因子本底。
采血部位对结果也有影响。耳缘静脉采血与心脏采血获得的IL-6浓度可存在差异,因为穿刺损伤本身会诱发局部炎症。建议长期纵向实验统一采用耳中央动脉,由同一操作人员完成,减少操作差异。
样本运输方面,兔全血采出后室温放置超过2小时,IL-6会被中性粒细胞表面受体结合并逐步降解,导致结果偏低。正确做法是采出后立即轻柔颠倒混匀抗凝,30分钟内完成离心,血浆吸出后干冰转运。
结果判读时需注意,兔对细菌内毒素高度敏感,采血器具若残留微量内毒素,可在30分钟内诱发血清IL-6飙升。所有耗材应使用无热原(pyrogen-free)级别,标准曲线R²应达到0.99以上,否则该批次数据不可用于组间统计。